이 글에서는 참고를 위해 일반적인 단백질 태그 8가지에 대해 이야기해보겠습니다 리포좀글루타치온.
그의
His 태그는 가장 인기 있는 단백질 태그 중 하나입니다. His6는 관심 단백질의 C-말단 또는 N-말단에 삽입할 수 있는 6개의 히스티딘 잔기로 구성된 융합 태그를 말합니다. 태그를 사용하면 하나는 정제 및 검출을 용이하게 하는 에피토프를 구성할 수 있고, 다른 하나는 정제를 용이하게 하는 고유한 구조적 특징(결합 리간드)을 구성하는 것입니다. 히스티딘 잔기의 측쇄는 고체 니켈과 강한 인력을 가지고 있어 고정화된 금속 킬레이트 크로마토그래피(IMAC)에 사용하여 재조합 단백질을 분리하고 정제할 수 있습니다.
플래그 태그
FLAG 태그가 붙은 단백질은 8개 아미노산을 인코딩하는 친수성 폴리펩타이드(DYKDDDDK)이고, 벡터에 구성된 코작 시퀀스는 FLAG와의 융합 단백질을 진핵 생물의 발현 시스템에서 더욱 효율적으로 만들어줍니다.
아비태그
그것은 단일 바이오틴화된 라이신 부위를 가진 15개 아미노산의 짧은 펩타이드로, 알려진 천연 바이오틴화된 서열과 완전히 다르며 표적 단백질의 N- 및 C-말단에 첨가될 수 있습니다. 융합 발현 후, 바이오틴 리가제에 의해 바이오틴화될 수 있습니다. 재조합 단백질을 정제하기 위해, 낮은 친화도의 단량체 아비딘 또는 아비딘 유도체가 선택되어 단백질 분리 및 정제와 단백질 상호작용 연구에 사용됩니다.
스냅태그
SNAP-태그는 인간 O6-메틸구아닌-DNA 메틸 전이(O6-알킬구아닌-DNA-알킬전이효소)에서 얻었습니다. SNAP의 활성 티올 부위는 페닐메틸구아닌이 운반하는 측쇄 페닐기를 받아들이고 구아닌을 방출합니다. 이 새로운 티오에테르 결합의 공유 결합은 SNAP이 운반하는 표적 단백질이 페닐메틸기가 운반하는 라벨을 운반할 수 있게 합니다.
정제되거나 정제되지 않은 SNAP-Tag 융합 단백질을 표면에 페닐메틸구아닌으로 고정된 매트릭스와 혼합함으로써, 단백질은 기질과 특이적으로 상호 작용하여 공유 결합을 형성할 수 있다. 융합 단백질은 매트릭스 표면에 간접적으로 고정되어 단백질 기능 또는 단백질 정제 에 대한 보다 편리하고 빠른 연구를 달성할 수 있다 .
GST(글루타치온 티올트랜스퍼라제)
GST 태그가 붙은 단백질 자체는 해독에 중요한 역할을 하는 전이효소이며, 본래 크기는 26kD입니다. GST 융합 발현 시스템은 대장균 및 효모와 같은 숙주 세포에서 발현될 수 있는 다양한 융합 단백질의 발현에 널리 사용됩니다. 결합된 융합 단백질은 본래 조건에서 10mM 환원 글루타치온으로 용출되었습니다. GST 태그는 효소 검정 또는 면역 검정으로 편리하게 검출할 수 있습니다. 태그는 재조합 단백질이 세포 외 프로테아제에 의해 분해되는 것을 방지하고 안정성을 개선하는 데 도움이 됩니다.
에프에프
GFP (녹색 형광 단백질)는 Hamamura 등이 해파리에서 발견했습니다. 파란색 파장 범위의 빛에 의해 여기되면 녹색 형광을 냅니다. GFP 태그는 단백질의 C 말단 또는 N 말단에 위치할 수 있으며, 이 시스템은 박테리아, 효모 및 포유류 세포를 포함한 다양한 세포 유형에서 널리 사용되었으며, 해당 GFP 태그 항체도 널리 사용되었습니다. GFP는 단백질 발현, 단백질 및 세포 형광 추적, 단백질 상호 작용 및 구조적 변화의 연구에서 중요한 역할을 합니다.